液相色谱仪（HPLC）是用液体做流动相、高压驱动、对混合物先分离后定量 / 定性的精密分析仪器，特别适合高沸点、热不稳定、大分子样品，是化学、医药、食品、环保实验室的 “标配”。
一、原理
分离本质：样品各组分在固定相（色谱柱填料）和流动相（液体溶剂）之间的分配 / 吸附能力不同，在高压下流过色谱柱时，保留时间不同，从而按顺序流出、被检测。
流程：流动相平衡→进样→高压带入色谱柱→组分分离→检测器转电信号→数据处理成色谱图（时间为横轴、信号为纵轴）。
与气相色谱（GC）对比：GC 适合易挥发、热稳定小分子；HPLC 适合难挥发、热不稳定、大分子（如药物、蛋白、多糖）。
二、仪器五大组件
1. 高压输液泵（心脏）
作用：以高压（40–50 MPa）、稳定流速（0.1–10 mL/min）输送流动相，分等度（单一配比）和梯度洗脱（程序变配比），提升复杂样品分离效率。
关键：流量准、脉动小、耐压高。
2. 进样系统（样品入口）
形式：六通阀（手动）/ 自动进样器（主流），精准注入1–100 μL样品。
要点：样品需0.22 μm 滤膜过滤，防堵柱。
3. 色谱柱（分离）
结构：不锈钢 / PEEK 管（长 10–25 cm，内径 2–5 mm），填充3–10 μm固定相颗粒。
主流类型：
反相柱（C18，常用）：非极性固定相，分离中 / 非极性化合物（药物、食品添加剂）。
正相柱（硅胶）：极性固定相，分离强极性物质。
离子交换柱：分离带电分子（蛋白、核酸）。
尺寸排阻柱（SEC）：按分子大小分离（聚合物、多糖）。
柱温箱：控温 ±0.1℃，保证保留时间重现性。
4. 检测器（眼睛）
UV / 紫外检测器（常用）：190–400 nm，测有紫外吸收物质（芳香族、共轭体系），ng 级灵敏度。
DAD / 二极管阵列：全波长扫描，峰纯度鉴定、多波长同时检测。
FLD / 荧光：灵敏度比 UV 高100–1000 倍，测荧光物质（多环芳烃、黄曲霉毒素）。
RID / 示差折光：测无紫外吸收物质（糖类、醇类）。
MS / 质谱：联用，精准定性、分子量测定（LC-MS）。
5. 数据处理系统
工作站：采集信号、生成色谱图、定性（保留时间）、定量（峰面积 / 峰高）、输出。
三、主要特点
? 适用广：不挑样品形态（液体 / 可溶固体），难挥发、热不稳定、大分子都能测。
? 分离效率高：柱效可达数万理论塔板数，复杂组分也能分开。
? 灵敏度高：痕量分析可达ppb 级。
? 定量准：重现性好，RSD＜1%。
? 自动化：自动进样、梯度洗脱、数据处理，高通量。
四、典型应用
制药：药物含量、纯度、杂质、有关物质检测（药典）。
食品：农残、兽药残留、添加剂、毒素（黄曲霉毒素、三聚氰胺）。
环境：水质、土壤有机污染物（多环芳烃、酚类）。
生命科学：蛋白质、核酸、多肽、代谢物分离分析。
化工 / 化妆品：原料纯度、成分分析、质量控制。
五、与你之前问的气源关联
氢气发生器：供FID 检测器燃气（GC 常用，HPLC 少用）。
氮气发生器：供LC-MS雾化气、蒸发光散射检测器（ELSD）载气、样品吹扫保护气。
二氧化氯发生器：用于实验室 / 环境消毒，与 HPLC 分析无直接关联。